DNA鉴定用什么方法做的?用的是什么DNA试剂盒呢?本文为您介绍7种dna试剂盒
dna鉴定试剂盒有哪些?
1、STR 检测试剂盒
STR 检测技术是目前法医DNA 鉴定中的主要手段,STR 遗传标记商业化的先驱是Promega 公司,1994 年推出第一个商品化STR 试剂盒(银染分析系统,3 个STR 基因座)。在20 世纪90 年代中后期,以美国ABI 公司为代表,研发出了荧光标记的STR 检测试剂盒,荧光标记的检测试剂盒开始成为法医鉴定中的主流。目前已经从单色荧光试剂盒(单色荧光标记系统,3-4 个基因座)发展到了六色荧光试剂盒(六色荧光标记系统,21 个STR 基因座和3 个性别基因座)。这些商品化的试剂盒结果稳定可靠,重复性好,符合法医DNA 鉴定的需求。目前这两家公司的产品牢牢占据了全球主要的法医DNA 检测市场。
2、miniSTR 检测试剂盒
2001 年911 恐怖事件中,miniSTR 检测技术由于极大地推动了遇难者个体识别工作而获得了正式命名。随后,miniSTR 检测技术得到广泛研究,2006 年美国ABI 公司率先推出miniSTR 检测试剂盒(五色荧光标记系统,8 个miniSTR 基因座和1 个性别基因座)。目前国内主要还处于miniSTR 基因座的研究开发阶段,公安部物证鉴定中心正在积极推进9 个STR 基因座的五色荧光miniSTR 检测试剂盒商品化的进程。中德美联的“六色Mini 荧光检测试剂盒”已完成研发,目前正处于产品上市准备阶段。
3、SNP 检测试剂盒
SNP 检测试剂盒的关键是需要有足够多的SNP 位点(至少50 个)来保证识别率,还需要具备相对便宜的成本优势,目前还不具备广泛的应用价值。目前市场主要是ABI(Applied Biosystems)公司生产的SNapShot 试剂盒,其中含有四种不同荧光标记的ddNTPs。该试剂盒采用的单碱基引物延伸技术可以一次性检测12 个或更多个SNPs 位点,平均成本较低,且其依赖的多色荧光检测设备已经应用于大多数法医学DNA 实验室,实用性相对较强。
随着高通量技术的发展和SNP 识别位点的增加,SNP 检测技术凭借突变率低的优点可能会成为未来主要检测技术。因此,国内外公司在SNP 试剂盒上的突破可能会产生未来的竞争优势。
4、mtDNA 检测试剂盒
mtDNA 具有染色体DNA 无可比拟的优势,但是由于异质性的原因导致了无法得到大规模应用推广。目前,中德美联的产品Mt60 是已上市的检测mtDNA 的试剂盒,可同时检测60 个SNP 位点,利用SNP 的低突变率弥补mtDNA 的异质性问题。未来随着事代技术(NGS)的发展,全基因组测序能很好地克服mtDNA 的异质性,mtDNA 检测技术也可能会成为未来的主流技术之一。
5、现场DNA 检测试剂盒
案件现场需要进行快速准确分型便于现场排查。目前市场上的现场检测试剂盒均可大幅缩短DNA 扩增反应时间从而达到快速的效果,主流产品有ABI 公司的AmpFℓSTR NGM(5 色荧光,15 个基因座),Promega 公司的PowerPlex 21(5 色荧光,21 个基因座)和中德美联的EX16(5 色荧光,16 个基因座)。由于追求快速效果,现场检测试剂盒的基因座检出个数较少,同时由于是基于STR检测技术,对于微量和高度降解的检材,检测能力有限。
6、亲缘鉴定检测试剂盒:性染色体STR 检测试剂盒
亲缘鉴定是利用DNA 分型检测技术综合评判个体之间的血缘关系,技术手段为性染色体检测技术。2003 年,Reliagene 公司推出了Y-Plex 系统,Promega 公司推出了Powerplex Y 系统开始实现了Y 染色体STR 检测试剂盒的商品化。2006 年,ABI 公司推出了AmpFISTER Y-Filer(五色荧光标记系统,17 个Y-STR 基因座)。目前ABI 公司的最新产品是六色荧光标记系统,能检测27 个Y-STR基因座(包括11 个miniSTR)。国内的Y-STR 试剂盒主要有中德美联的Y24 plus (六色荧光标记系统,32 个Y-STR 基因座)和北京基点认知的30Y 试剂盒(六色荧光标记系统,30 个Y-STR 基因座)。
X 染色体STR 检测试剂盒的商品化相对Y 染色体要落后,主要有Mentype®ArgusX-8 试剂盒(Biotype 公司推出的第事代商业化试剂盒,可以同时检测8 个X-STR 基因基因座)以及2010 年上市的Investigator Argus X-12 Kit(可检测12 个X-STR 基因座)。国内的中德美联也推出了X 染色体STR 检测试剂盒X12(5 色荧光标记系统,13 个基因座)。
7、组合试剂盒
由于STR 和SNP 的检测互补性,一些公司开始探索STR 和SNP 组合试剂盒的开发,但是由于DNA检测仪器的局限性,混合试剂盒的开发仅处于初始阶段,例如ABI 公司的Y filer Plus,可以同时检测STR 和miniSTR,但无法做到STR 和SNP 的混合检测。
新一代测序技术(NGS)能够对整个基因组进行检测,兼具高通量性和高深度性,因此可以同时对STR 和SNP进行检测分析。Illumina 公司基于MiSeq FGx 检测仪开发出的ForenSeq DNA Signature Prep 试剂盒,可同时检测200 多个遗传标记(58 个STR 和172 个SNP),不仅能完成常规鉴定工作,还能预测眼睛和头发的颜色,鉴定能力非常强大。
亲子鉴定用什么仪器和试剂
NA亲子鉴定自2000年以来,所使用的仪器和试剂逐渐向标准化过渡,如现在大多数亲子鉴定中心使用的ABI公司生产的毛细管测序仪(也叫遗传分析仪),其中310、3100、3130这几种型号的遗传分析仪,样本电泳时使用的胶,还有检测样本时使用的荧光标记试剂盒都是通过FDA认证。这种认证,保证了仪器和试剂的稳定性和可靠性。
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